Hoe om 'n proteïen te denatureer: 7 stappe (met foto's)

INHOUDSOPGAWE:

Hoe om 'n proteïen te denatureer: 7 stappe (met foto's)
Hoe om 'n proteïen te denatureer: 7 stappe (met foto's)

Video: Hoe om 'n proteïen te denatureer: 7 stappe (met foto's)

Video: Hoe om 'n proteïen te denatureer: 7 stappe (met foto's)
Video: Шпатлевка стен и потолка. З способа. Какой самый быстрый? 2024, Maart
Anonim

Miskien wil u 'n proteïen vir 'n wetenskaplike projek denatureer, of miskien het u gelees oor gedenatureerde voedsel en wil u weet hoe dit werk. Denaturasie is die proses waardeur 'n proteïen sy vorm en struktuur verloor as gevolg van aksies van eksterne kragte, insluitend hitte, bestraling, sure en oplosmiddels. Organiese oplosmiddels denatureer gewoonlik proteïene. Die presiese manier waarop u 'n proteïen denatureer, hang af van die spesifieke een waarmee u wil werk, aangesien hulle almal verskillende denatureringsmiddels op verskillende vlakke benodig. Die meeste proteïene kan egter gedenatureer word as u weet wat u in die proteïenomgewing moet verander.

Stappe

Metode 1 van 2: Denaturering van 'n proteïen

Denatureer 'n proteïen Stap 1
Denatureer 'n proteïen Stap 1

Stap 1. Gebruik hitte

Hitte is een van die maklikste en mees algemene maniere om 'n proteïen te denatureer. As die betrokke proteïen in voedsel voorkom, sal die proteïene slegs gedenatureer word deur die kos te kook. Baie proteïene kan gedenatureer word deur dit bloot te stel aan 'n temperatuur van of bo 100 ° C (212 ° F). Dit stel die proteïene in staat om op te los en hul oplosbaarheid te verminder.

Die lengte van die blootstelling hang af van wat u aan hitte blootstel. 'N Eier kan byvoorbeeld binne vyf minute in 'n pan op medium hitte kook, terwyl dit in 'n oond ure lank kan braai

Denatureer 'n proteïen Stap 2
Denatureer 'n proteïen Stap 2

Stap 2. Dien alkohol toe

Alkohol versteur die waterstofbindings wat tussen amiedgroepe van 'n peptiedbinding voorkom. As 'n proteïen aan 'n alkoholoplossing blootgestel word, vorm die alkoholmolekules nuwe bindings met die proteïenketting. Gebruik 'n oplossing van 70% alkohol om deur die selwand van bakterieë te breek en die proteïen te denatureer.

Gekonsentreerde alkohol kan gevaarlik wees, aangesien dit vlambaar en giftig is. Dra altyd volledige veiligheidstoerusting, insluitend handskoene en oogbeskerming, en hanteer dit in 'n veilige, temperatuurbeheerde omgewing

Denatureer 'n proteïen Stap 3
Denatureer 'n proteïen Stap 3

Stap 3. Verander die pH

Die interne struktuur van 'n proteïen kan afgebreek word as sy omgewing baie suur of baie alkalies is, aangesien dit die ioniese bindings wat die soutbrug van die proteïen bymekaar hou, ontwrig. Voeg 'n suur- of basisoplossing by die proteïen. Die omliggende omgewing moet 'n pH van hoër as 10 of onder 4 hê om denaturasie aan te moedig. As u die verandering met suur veroorsaak, moet die pH tussen 2 en 5 wees.

Deur die pH te verander, kan 'n aminosuur ioniseer, afhangende van die pKa van elke funksionele groep in die aminosuur. U kan ook die aminogroep of karboksielgroep wat in die aminosuur voorkom, ioniseer

Denatureer 'n proteïen Stap 4
Denatureer 'n proteïen Stap 4

Stap 4. Probeer swaar metaal soute

Swaar metale kan die bindings in die proteïen ontwrig, wat veroorsaak dat dit sy struktuur verloor. Soute van swaar metale soos kwik en lood kan gebruik word om verskillende proteïene te denatureer. Sulke soute is beskikbaar by die meeste chemiese verskaffers, en moet altyd met omsigtigheid en behoorlike veiligheidstoerusting, insluitend handskoene en oogbeskerming, gebruik word.

Swaar metale kan interaksie hê met 'n proteïen se funksionele sykettinggroepe om komplekse te vorm. Swaar metale oksideer ook die proteïen se aminosuur -sykettings

Metode 2 van 2: Herlewing van proteïene

Denatureer 'n proteïen Stap 5
Denatureer 'n proteïen Stap 5

Stap 1. Bepaal of 'n proteïen weer kan vou

Sommige vorme van denaturasie is permanent, terwyl ander ongedaan gemaak kan word. Om 'n eier of vleis te kook, kan byvoorbeeld nie ongedaan gemaak word nie, maar 'n proteïen wat aan 'n hoë pH blootgestel is, kan weer vorm kry as dit in 'n meer neutrale omgewing geplaas word.

Of die proteïen hervul kan word, hang af van die DNA daarvan. Die DNA bevat die inligting wat nodig is om die proteïen terug te keer na sy eie toestand

Denatureer 'n proteïen Stap 6
Denatureer 'n proteïen Stap 6

Stap 2. Verwyder die denatureringsfaktor

Keer die omgewing rondom die proteïen weer tot stilstand en verwyder die denatureringselement. Verwyder byvoorbeeld die suur of basis, of bring die proteïen terug na 'n meer redelike temperatuur.

Denatureer 'n proteïen Stap 7
Denatureer 'n proteïen Stap 7

Stap 3. Gebruik 'n hernuwingstel

Baie laboratoriumondernemings verkoop hernuwingsstelle waarmee u die beste parameters kan ondersoek om renaturasie aan te moedig. Sulke kits kan veral nuttig wees as u na 'n laboratorium of eksperimentele omgewing na proteïene kyk.

Wenke

  • 'N Gedenatureerde proteïen verloor sy kwartêr-, tersiêre en sekondêre struktuur wat in sy eie toestand voorkom, maar sy primêre struktuur sal bly.
  • 'N Gedenatureerde proteïen verloor ook 'n deel van sy bioaktiwiteit, in sommige gevalle, net soos met ensieme, wat die funksionele vermoë verloor. Substrate kan byvoorbeeld nie meer bind aan ensieme wat gedenatureer is nie.
  • Die gedenatureerde proteïen kan sy oplosbaarheid in 'n oplossing verloor.
  • U kan ook nukleïensure denatureer deur laboratoriumtegnieke te gebruik om die stringe te skei.

Aanbeveel: